基于流感假型的功能性测定,用于测量HA头、HA柄和NA定向抗体反应

流感假型已被我们广泛用于疫苗工业的血清学分析,并可能有助于流感疫苗的许可,至少作为一种辅助分析。在一个联合研究通过诺华疫苗,我们发现假型可用于敏感量化大流行前H5N1疫苗引起的中和抗体反应,这些反应与血凝抑制(HI)、单放射状溶血(SRH)和微中和(MN)测量的反应显著相关。我们已经达成了协议。优化协议可用于进行这种伪型中和试验。下面的卡通插图取自该协议。

流感假型中和分析已被证明对HA柄反应的测量非常敏感,这是许多“通用疫苗”方法的主要目标之一。针对茎部的响应可以通过使用a来与针对头部的响应分开混合HA假型试验.我们创造的一种混合假型病毒具有取自2009年大流行H1N1毒株的HA柄,以及取自野生鸟类中发现的H11毒株的HA球状头。人类对H11的血清学反应性可以忽略不计,因此如果使用这种杂交HA假型进行中和试验,就可以很容易地测量仅针对HA柄的反应。

监管机构使用的传统HI试验(其中存在免疫相关性)仅测量对球状HA头的反应,因此不适合许多新的“通用疫苗”的许可目的。随着许多新疫苗进入临床阶段,HA柄血清学分析,如基于假型或ELISA的血清学分析,无疑将获得突出地位。

对于神经氨酸酶(NA),基于假型的酶联凝集素测定(PV -埃拉)已被开发出来,可以量化抗体对NA的反应。该检测创新地使用仅含NA的假型作为NA的来源。详尽的PV-ELLA协议在这里可以找到。这种PV-ELLA对研发界的可用性具有重要意义,因为这意味着可以在不需要获得通常带有IP的反向遗传(RG)病毒的情况下进行ELLA分析。此外,重组疫苗中NA含量的标准化也有进展,这使得PV-ELLA检测越来越重要。

注:我们之前还共同开发并测试了NA抑制剂的基于细胞的PV释放试验在这里发表

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