D型流感病毒(IDV)已在世界各地许多动物物种和潜在人类中报告。牛被认为是主要的宿主。目前基于血凝素酯酶(HEF)基因的主要谱系有三种:D/OK, D/660和D/Japan。我们使用假型慢病毒(pv)进行了IDV的试点监测，以生成基于细胞的测试，以识别动物先前暴露于IDV。构建HEF基因D/swine/Italy/2015、D/bovine/France/2014、D/bovine/Ibaraki/2016的表达质粒。HEF质粒与表达荧光素酶的慢病毒载体质粒、慢病毒Gag-Pol质粒和HAT蛋白酶质粒(HEK293T/17)共转染。转染后3天，收集上清液，用于不同细胞系的滴定和微量中和试验。使用D/swine/Italy/2015和D/swine/Oklahoma/2011疫苗接种的猪血清对微量中和试验进行初步验证。所有猪血清对D型流感(意大利)假型慢病毒具有中和活性。使用微中和试验筛选了分别从英国农场收集的145份和114份牛和羊血清标本。 We found 97 bovine sera (66.9%) were influenza D antibody positive. Collectively, pseudotyped lentivirus technology opens up opportunities for serological surveillance of influenza D viruses.
- 在线发布:10/07/2020
https://doi.org/10.1099/acmi.ac2020.po0582
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